Immunohistochemistry: Basics and Methods - 9783642046087

Łącząc dwie różne dyscypliny naukowe – morfologię i immunochemię – immunohistochemię, opracowano ważne narzędzie w badaniach i patologii klinicznej. Podstawowe zrozumienie podstawowych zasad i potencjalnych problemów jest nieuniknione, jeśli chcesz odnieść sukces w stosowaniu immunochemii, a także opublikować swoje artykuły i sfinansować granty badawcze. Chociaż istnieje wiele doskonałych tekstów i monografii, które obejmują różne aspekty immunohistochemii, główną motywacją do napisania tej książki był brak zwięzłego i kompleksowego przewodnika po korzystaniu z tych metod. Naszą intencją było stworzenie łatwych do odczytania i ukierunkowanych zasobów opartych na najnowocześniejszych informacjach dla odbiorców zagranicznych, począwszy od studentów i asystentów technicznych po doświadczonych badaczy. Podręcznik ten ma zwięzłą formę, zawiera protokoły i instrukcje dotyczące metod, które znajdują się bezpośrednio po krótkim wprowadzeniu, w każdym rozdziale, w materiale teoretycznym. Mając świadomość rosnącej roli Internetu jako źródła informacji, uznaliśmy, że w wielu przypadkach rozsądne jest zastąpienie cytowania książek i publikacji prasowych odpowiednimi stronami internetowymi. Tam, gdzie to możliwe, komercyjne źródła odczynników, zestawów i sprzętu są wymienione w całym tekście zamiast w oddzielnym indeksie. Choć każdy rozdział jest niewielki i wprowadzający, podręcznik sam w sobie jest samowystarczalny i zapewnia wszechstronne spojrzenie na zasady immunohistochemii. Dla czytelników pragnących pogłębionej wiedzy każdy rozdział jest uzupełniony krótką listą starannie wybranych oryginalnych artykułów. W ciągu ostatniej dekady pionierskie wysiłki histochemików doprowadziły do ulepszenia odczynników i protokołów. Zaleca się, aby badacze zawsze ustalali przyczynę każdej metody i krok przed jej wykonaniem. Celem niniejszego podręcznika jest pomóc czytelnikom uniknąć problemów z wyborem odpowiedniej metody, które zdarzają się w przypadku korzystania ze standardowych podręczników. W tym podręczniku starannie wybraliśmy ustalone metody i łatwe do przyjęcia protokoły, zwracając uwagę na nowoczesne osiągnięcia w immunohistochemii, takie jak pozyskiwanie antygenów, wzmacnianie sygnału, wykorzystanie znaczników epitopowych w immunohistochemii, wielokrotne znakowanie immunologiczne lub diagnostyka immunohistochemiczna. Każda z metod opisanych w tym podręczniku v vi Przedmowa została udowodniona przez autorów, wiele z tych metod jest rutynowo stosowanych w codziennej praktyce w ich instytucie. Wszystkie zalecane metody praktyczne są jasno opisane wraz z załączonymi tabelami, a możliwe do uzyskania wyniki są zilustrowane kolorowymi mikrofotografiami. Podziękowania Dziękujemy Verze Samoilovej za doskonałą pomoc techniczną oraz innym kolegom z kliniki Uniwersytetu w Munster za udostępnienie sond i odczynników. Igor B. Buchwalowand WernerBocker Munster Zawartość 1 Przeciwciała do immunohistochemii ...1 1. 1 Struktura przeciwciał ...2 1. 2 Przeciwciała poliklonalne ...4 1. 3 MysiePrzeciwciała monoklonalne ...4 1. 4 KrólikPrzeciwciała monoklonalne ...5 1. 5 Białko i białkoGinImmunohistochemia ...7 Referencje ...8 2 Oznakowanie przeciwciał i wybór etykiety ...9 2. 1 Kowalencyjne oznakowanie przeciwciał ... 9 2. 2 Niekowalencyjne oznakowanie przeciwciał pierwotnych za pomocą oznaczonych fragmentów Fab ... 10 2. 3 Etykiety enzymatyczne do mikroskopii świetlnej ... 13 2. 4 Etykiety fluoroforowe do mikroskopii fluorescencyjnej ... 15 2. 5 Koloidalne Złote etykiety dla mikroskopii elektronowej. ..16 Literatura ...17 3 SondyPrzetwarzanie w immunohistochemii ...19 3. 1 Utrwalanie w immunohistochemii ...19 3. 1. 1 Utrwalanie w alkoholach i acetonie ...20 3. 1. 2 Utrwalanie w formaldehydzie ...20 3. 1. 3 Wpływ wiązania formaldehydem na antygen- nster Spis treści 1 Przeciwciała do immunohistochemii ...1 1. 1 Struktura przeciwciał ...2 1. 2 Przeciwciała poliklonalne ...4 1. 3 Mysie przeciwciała monoklonalne ...4 1. 4 Królicze Przeciwciała monoklonalne ...5 1. 5 Białka i białkaGinImmunohistochemia ...7 Literatura . ..8 2 Oznakowanie przeciwciał i wybór etykiety ...9 2. 1 Kowalencyjne oznakowanie przeciwciał ...9 2. 2 Niekowalencyjne oznakowanie przeciwciał pierwotnych oznaczonymi fragmentami Fab ... 10 2. 3 Etykiety enzymatyczne do mikroskopii świetlnej ... 13 2. 4 Etykiety fluoroforowe do mikroskopii fluorescencyjnej ... 15 2. 5 Złoto koloidalneEtykiety do mikroskopii elektronowej .. .16 Literatura ...17 3 SondyPrzetwarzanie w immunohistochemii ...19 3. 1 Utrwalanie w immunohistochemii ..